Plasmide Double Nickase (h) CXCL16: sc-405248-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CXCL16 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CXCL16 Double Nickase (h) et le plasmide CXCL16 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CXCL16. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CXCL16 Antibody (C-5): sc-514363
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CXCL16 | sc-405248-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CXCL16 | sc-405248-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCL16 code une chimiokine transmembranaire pouvant être clivée par protéolyse afin de générer un ligand soluble de CXCR6, coordonnant la chimiotaxie et la rétention des lymphocytes T activés, des cellules NK et d’autres sous-populations de leucocytes. Via une signalisation dépendante de CXCR6, CXCL16 contribue au trafic leucocytaire, à l’adhésion et au dialogue inflammatoire au sein des tissus, reliant les gradients de chimiokines à la surveillance immunitaire et au remodelage tissulaire. La forme membranaire agit également comme récepteur scavenger des lipides oxydés et des débris apoptotiques, établissant un lien entre la reconnaissance immunitaire innée et les voies de signalisation inflammatoires. Une activité dérégulée de l’axe CXCL16/CXCR6 a été associée à des affections inflammatoires chroniques, à des processus liés à l’athérosclérose et à la dynamique du microenvironnement immunitaire tumoral, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de l’immunopathologie.
CXCL16 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CXCL16 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CXCL16. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CXCL16. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CXCL16.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.