CXCL16 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425819

Descripción general

Cxcl16 codifica CXCL16, una quimiocina transmembrana que puede liberarse por escisión proteolítica para generar un ligando soluble de CXCR6, coordinando el reclutamiento quimiotáctico y la retención de células T activadas, células NK T y otros subtipos de leucocitos. CXCL16 participa en redes de señalización inflamatoria que configuran la vigilancia inmunitaria tisular, la adhesión de leucocitos y la comunicación cruzada impulsada por citocinas dentro de los microambientes vasculares y parenquimatosos. En modelos murinos, la señalización CXCL16/CXCR6 se ha vinculado a procesos como la inflamación aterosclerótica, el tráfico de células inmunitarias en hígado y pulmón y las interacciones tumor–inmunidad, lo que la hace relevante para estudios de inflamación crónica y patología inmunomediada. Su regulación se entrecruza con programas inflamatorios asociados a NF-κB y con vías de escisión del ectodominio que controlan el equilibrio entre la actividad quimiocínica unida a membrana y la soluble.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CXCL16 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cxcl16 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cxcl16 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cxcl16 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CXCL16.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cxcl16 para la investigación de la señalización de CXCL16, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cxcl16 críticos para la función de CXCL16
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cxcl16 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CXCL16 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CXCL16 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cxcl16. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CXCL16 (m) y el plásmido HDR CXCL16 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cxcl16 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cxcl16 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.