Plasmide CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (m): sc-421190
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CUZD1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CUZD1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CUZD1 Antibody (E-10): sc-514578
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (m) | sc-421190 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cuzd1 code pour CUZD1, une protéine contenant un domaine CUB et un domaine de type zone pellucide, impliquée dans la biologie des cellules épithéliales et la fonction des glandes sécrétoires, avec des rôles rapportés dans le traitement des protéines et la sécrétion régulée. Dans les tissus murins, l’expression de CUZD1 est enrichie dans les épithéliums glandulaires et a été associée à des voies contrôlant la différenciation cellulaire, le remodelage tissulaire et les réponses aux signaux inflammatoires. Une régulation altérée de CUZD1 a été liée à des modifications de l’homéostasie épithéliale et des programmes prolifératifs, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques des tissus barrières et de la physiologie des organes exocrines. En tant que modulateur dépendant du contexte de l’état cellulaire, CUZD1 constitue un point d’entrée pour disséquer les réseaux géniques qui couplent la fonction sécrétoire aux signaux de croissance et de stress.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cuzd1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cuzd1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cuzd1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CUZD1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cuzd1 pour l'étude de la signalisation de CUZD1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cuzd1 essentiels à la fonction de CUZD1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cuzd1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CUZD1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CUZD1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cuzd1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CUZD1 plasmide HDR (m) et le CUZD1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cuzd1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cuzd1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.