Plasmide CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (h): sc-407311

Présentation

CUZD1 (CUB and zona pellucida-like domains 1) code une protéine sécrétée et associée à la membrane, impliquée dans la différenciation des cellules épithéliales et l’homéostasie des tissus sécrétoires. CUZD1 participe à des processus liés au trafic des protéines et à la sécrétion régulée, et a été associé à des programmes transcriptionnels en aval de la signalisation par les cytokines, notamment à des voies impliquant l’activité JAK/STAT dans les épithéliums glandulaires. Une expression altérée de CUZD1 a été rapportée dans des cancers d’origine épithéliale et dans des états inflammatoires, ce qui étaye son intérêt comme nœud moléculaire pour étudier les transitions d’état cellulaire, les réponses au stress et les phénotypes associés aux tumeurs. Dans des systèmes modèles humains, CUZD1 constitue une cible exploitable pour disséquer les mécanismes de remodelage épithélial et les réponses de signalisation dépendantes du contexte.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CUZD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CUZD1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CUZD1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CUZD1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CUZD1 pour l'étude de la signalisation de CUZD1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de CUZD1 essentiels à la fonction de CUZD1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CUZD1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le CUZD1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CUZD1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CUZD1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le CUZD1 plasmide HDR (h) et le CUZD1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CUZD1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CUZD1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.