Plasmide Double Nickase (h) CTPS1: sc-403505-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CTPS1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CTPS1 Double Nickase (h) et le plasmide CTPS1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CTPS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CTPS1 | sc-403505-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CTPS1 | sc-403505-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **CTPS1** code la CTP synthase 1, une enzyme cytosolique qui catalyse l’amination de l’UTP en CTP, dépendante de l’ATP, étape limitante de la biosynthèse *de novo* des nucléotides pyrimidiques. En contrôlant les réserves intracellulaires de CTP, CTPS1 soutient la synthèse de l’ADN et de l’ARN, la production de phospholipides et l’adaptation métabolique au cours de la progression du cycle cellulaire et lors d’un stress prolifératif. L’activité de CTPS1 s’articule avec les voies de sauvetage des nucléotides et le métabolisme à un carbone dépendant des folates, et peut s’assembler en structures filamenteuses appelées cytoophidies, associées à la régulation de l’activité enzymatique. Une dérégulation du métabolisme des pyrimidines et une dépendance à CTPS1 ont été associées à une capacité proliférative modifiée dans des contextes immunitaires et liés au cancer, faisant de CTPS1 une cible utile pour étudier l’homéostasie des nucléotides et le contrôle de la croissance.
CTPS1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CTPS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CTPS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CTPS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CTPS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.