Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) CTL2: sc-402652-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CTL2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CTL2 Double Nickase (h) et le plasmide CTL2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC44A2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CTL2 Antibody (F7): sc-101266
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CTL2 | sc-402652-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CTL2 | sc-402652-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC44A2 code pour la protéine 2 de type transporteur de choline (CTL2), une protéine membranaire multipasse impliquée dans le transport de la choline et le métabolisme des phospholipides, qui soutient la biogenèse des membranes et l’homéostasie cellulaire. L’activité de CTL2 s’inscrit dans des voies nécessitant la phosphatidylcholine dérivée de la choline, ce qui la relie à la fonction des organites, à la signalisation cellulaire et aux réponses au stress. Dans les contextes hématopoïétiques et vasculaires, SLC44A2 a été associé à la biologie des plaquettes et des neutrophiles ainsi qu’aux processus thrombo-inflammatoires, et il est également reconnu comme l’antigène HNA-3, pertinent pour certaines réactions à médiation immunitaire. Des altérations de la régulation de SLC44A2 ont été étudiées dans des situations impliquant l’inflammation, les mécanismes des maladies vasculaires et le remodelage des lipides membranaires propre à certains tissus.
CTL2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC44A2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC44A2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC44A2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC44A2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.