Plasmide Double Nickase (h) CTGF: sc-400091-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CTGF correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CTGF Double Nickase (h) et le plasmide CTGF Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CTGF. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CTGF Antibody (E-5): sc-365970
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CTGF | sc-400091-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CTGF | sc-400091-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le facteur de croissance du tissu conjonctif (CTGF/CCN2) est une protéine matricellulaire sécrétée qui module les interactions cellule–matrice, la prolifération, la migration et le dépôt de matrice extracellulaire (MEC). Il agit en aval de la signalisation TGF-β/SMAD et intègre des signaux provenant des intégrines, de la voie MAPK et des voies de mécanotransduction YAP/TAZ afin de coordonner l’activation des fibroblastes et le remodelage tissulaire. Une expression dérégulée de CTGF est associée à des programmes fibrosants et à un remodelage stromal aberrant, avec une large pertinence pour la biologie de la fibrose des organes et la recherche sur le microenvironnement tumoral. In vitro, CTGF est couramment étudié pour ses rôles dans la différenciation des myofibroblastes, la synthèse de collagène, les réponses angiogéniques et la régulation du dialogue entre cellules inflammatoires au sein des tissus en remodelage.
CTGF Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CTGF dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CTGF. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CTGF. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CTGF.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.