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Plasmide Double Nickase (m) CtBP2 | sc-419868-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) CtBP2 | sc-419868-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Ctbp2** code la protéine de liaison au C-terminus 2 (CtBP2), un corégulateur transcriptionnel sensible au NADH qui relie l’état métabolique cellulaire au remodelage de la chromatine et à l’expression génique. CtBP2 s’associe à des facteurs de transcription se liant à l’ADN et à des complexes corépresseurs pour moduler la désacétylation des histones et d’autres mécanismes épigénétiques qui contrôlent la différenciation, les programmes du cycle cellulaire et la transcription en réponse au stress. En régulant des voies telles que Wnt/β-caténine, TGF-β et les sorties transcriptionnelles associées à Notch, CtBP2 influence la transition épithélio-mésenchymateuse, le développement neuronal et les réseaux de gènes synaptiques. Une activité de CTBP2 dérégulée et un déséquilibre des corépresseurs ont été associés à des phénotypes pertinents pour les maladies, notamment la progression tumorale, des anomalies du neurodéveloppement et l’adaptation métabolique des cellules prolifératives.
CtBP2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ctbp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ctbp2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ctbp2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ctbp2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.