Plasmide Double Nickase (h) CtBP2: sc-401865-NIC

Le gène humain **CTBP2** code la protéine de liaison au C-terminal 2 (**CtBP2**), un corégulateur transcriptionnel sensible au **NADH** qui agit principalement comme **corépresseur** en recrutant des complexes modificateurs de la chromatine, notamment des **HDAC** et d’autres régulateurs épigénétiques, vers des facteurs de transcription spécifiques de séquences. CtBP2 influence des programmes géniques contrôlant la prolifération, la spécification de lignée, la transition épithélio-mésenchymateuse et l’apoptose, reliant l’état métabolique cellulaire à la sortie transcriptionnelle. Par ces activités, CtBP2 module des voies telles que **Wnt/β-caténine**, **TGF-β** et des réseaux transcriptionnels associés à l’hypoxie, et contribue à façonner l’accessibilité de la chromatine ainsi que l’activité des enhancers. Une expression ou une fonction dérégulée de **CTBP2** a été associée à une différenciation altérée et à des états transcriptionnels liés aux tumeurs, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques de la répression transcriptionnelle et du contrôle métabolique de la régulation génique.

CtBP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CTBP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CTBP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CTBP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CTBP2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.