Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CRX (m): sc-419817
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CRX Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CRX, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CRX Antibody (A-9): sc-377138
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CRX (m) | sc-419817 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Crx code le facteur de transcription à homéoboîte cône-bâtonnet (CRX), un régulateur maître de la différenciation et du maintien des photorécepteurs dans la rétine de souris. CRX se lie à des éléments cis-régulateurs pour stimuler l’expression de gènes nécessaires à la phototransduction, à la biogenèse du segment externe et à la fonction synaptique, en intégrant des réseaux transcriptionnels avec d’autres facteurs de lignée rétinienne. La perturbation des programmes géniques dépendants de CRX compromet la maturation et la survie des bâtonnets et des cônes, reliant cette voie à des phénotypes de dégénérescence rétinienne héréditaire. En conséquence, Crx est largement étudié pour élucider les mécanismes du développement rétinien, la régulation génique des photorécepteurs et les relations génotype–phénotype dans des modèles de maladies du système visuel.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CRX (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Crx dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Crx, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Crx à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CRX.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Crx pour l'étude de la signalisation de CRX, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Crx essentiels à la fonction de CRX
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Crx pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CRX plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CRX plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Crx. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CRX plasmide HDR (m) et le CRX (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Crx pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Crx définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.