CRP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406188

Übersicht

CSRP1 kodiert das cystein- und glycinreiche Protein 1 (CRP1), einen Aktin-bindenden Faktor mit LIM-Domäne, der die Organisation des Zytoskeletts sowie Transkriptionsprogramme moduliert, die mit Zellform und Motilität verknüpft sind. CRP1 ist an der Dynamik von Aktin-Stressfasern und an signalgebenden Prozessen im Zusammenhang mit Fokalkontakten beteiligt und trägt so zur Koordination der glatten Muskelzelldifferenzierung und des allgemeinen Verhaltens mesenchymaler Zellen bei. Durch die Beeinflussung adhesionsabhängiger Signalwege und genregulatorischer Netzwerke wird CSRP1 häufig im Kontext von Gewebeumbau und zellulärer Invasion untersucht. Eine veränderte CSRP1-Expression wurde in mehreren Krankheitskontexten beschrieben, darunter Krebserkrankungen und fibrotische Pathologien, bei denen Veränderungen in der Kontrolle des Zytoskeletts und im Differenzierungszustand zentrale experimentelle Themen sind.

Das CRP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CSRP1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CSRP1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CSRP1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CRP1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CSRP1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CRP1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CSRP1-Exone abzielen, die für die CRP1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CSRP1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CRP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CRP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CSRP1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CRP1 HDR-Plasmid (h) und CRP1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CSRP1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CSRP1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.