Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CRP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406188
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CRP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CRP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CRP1 Anticuerpo (F-12): sc-390418
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CRP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406188 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CSRP1 codifica la proteína 1 rica en cisteína y glicina (CRP1), un factor de unión a actina que contiene un dominio LIM y que modula la organización del citoesqueleto y programas transcripcionales vinculados con la forma celular y la motilidad. CRP1 participa en la dinámica de las fibras de estrés de actina y en la señalización asociada a las adhesiones focales, ayudando a coordinar la diferenciación del músculo liso y, de manera más amplia, el comportamiento de células mesenquimales. Al influir en vías dependientes de la adhesión y redes reguladoras de genes, CSRP1 se estudia con frecuencia en contextos de remodelación tisular e invasión celular. Se han reportado alteraciones en la expresión de CSRP1 en múltiples escenarios de enfermedad, incluidos cánceres y patologías fibróticas, donde los cambios en el control del citoesqueleto y en el estado de diferenciación son temas experimentales centrales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CRP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CSRP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CSRP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CSRP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CRP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CSRP1 para la investigación de la señalización de CRP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CSRP1 críticos para la función de CRP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CSRP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CRP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CRP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CSRP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CRP1 (h) y el plásmido HDR CRP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CSRP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CSRP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.