Plasmide Double Nickase (h) CRISP-10: sc-413493-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CRISP-10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CRISP-10 Double Nickase (h) et le plasmide CRISP-10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CRISPLD1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CRISP-10 | sc-413493-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CRISP-10 | sc-413493-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **CRISPLD1** code la protéine sécrétée riche en cystéines **CRISP-10**, membre de la superfamille **CAP**, caractérisée par des motifs de cystéines conservés qui favorisent les interactions protéine–protéine dans l’espace extracellulaire. CRISP-10 est impliquée dans la régulation de l’adhésion cellulaire et de l’organisation de la matrice extracellulaire, ce qui la relie aux processus de remodelage tissulaire qui façonnent la migration cellulaire et la morphogenèse. Des études d’expression et fonctionnelles associent CRISPLD1 à des phénotypes pertinents pour le développement et le système cardiovasculaire, en accord avec des rôles dans des environnements de signalisation influençant la différenciation et l’intégrité structurelle. Une activité dérégulée de CRISPLD1/CRISP-10 a été rapportée dans des signatures transcriptomiques associées à des maladies, ce qui soutient son utilisation comme cible mécanistique dans des recherches orientées vers les voies et les biomarqueurs.
CRISP-10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CRISPLD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CRISPLD1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CRISPLD1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CRISPLD1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.