Plasmide Double Nickase (h) CREB3L4: sc-417626-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CREB3L4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CREB3L4 Double Nickase (h) et le plasmide CREB3L4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CREB3L4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CREB3L4 Antibody (D-8): sc-514052
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CREB3L4 | sc-417626-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CREB3L4 | sc-417626-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CREB3L4 (cAMP responsive element binding protein 3-like 4) est un facteur de transcription bZIP ancré à la membrane du réticulum endoplasmique (RE), qui peut être activé par une protéolyse intramembranaire régulée afin de moduler des programmes d’expression génique liés à l’homéostasie de la voie sécrétoire. Il participe à des réponses cellulaires associées à la signalisation du stress du RE et aux réseaux transcriptionnels liés à la réponse aux protéines mal conformées (UPR), influençant la différenciation et l’adaptation métabolique. L’activité de CREB3L4 a été étudiée dans des tissus hormono‑dépendants et dans des cancers, où une expression altérée ou des sorties transcriptionnelles en aval peuvent être corrélées à des modifications de la prolifération, de la signalisation de survie et de phénotypes invasifs. Ces propriétés font de CREB3L4 une cible utile pour analyser les mécanismes de contrôle transcriptionnel reliant la fonction du RE à des états cellulaires associés aux maladies.
CREB3L4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CREB3L4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CREB3L4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CREB3L4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CREB3L4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.