Plasmide Double Nickase (h) CREB1: sc-400160-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CREB1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CREB1 Double Nickase (h) et le plasmide CREB1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CREB1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CREB1 Antibody (X-12): sc-240
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CREB1 | sc-400160-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CREB1 | sc-400160-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CREB1 code la protéine 1 se liant à l’élément de réponse à l’AMPc (CREB1), un facteur de transcription bZIP qui se fixe sur les motifs CRE afin de coordonner l’expression génique dépendante des stimuli. CREB1 intègre des signaux issus des voies AMPc/PKA, kinases Ca2+/calmoduline et MAPK/ERK, façonnant des programmes impliqués dans la plasticité neuronale, le métabolisme, le contrôle du cycle cellulaire et les réponses au stress. Via un recrutement de coactivateurs dépendant de la phosphorylation (p. ex. CBP/p300), CREB1 module la chromatine et les sorties transcriptionnelles dans divers types cellulaires. Une activité dysrégulée de CREB1 a été associée à des altérations de la signalisation immunitaire et inflammatoire, à des phénotypes neuropsychiatriques et à des réseaux transcriptionnels oncogéniques, ce qui en fait une cible largement utilisée pour l’étude des voies de signalisation et des mécanismes de maladie.
CREB1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CREB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CREB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CREB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CREB1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.