CR1L Double Nickase Plasmid (h): sc-405453-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CR1L Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CR1L Double-Nickase-Plasmid (h) und CR1L Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CR1L abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CR1L Double Nickase Plasmid (h) | sc-405453-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CR1L Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405453-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Complement receptor 1-like (CR1L) ist ein menschliches Gen, das als komplementrezeptorverwandtes Mitglied der Familie der Regulatoren der Komplementaktivierung annotiert ist und strukturelle Merkmale mit CR1 teilt, die an der Opsonisierung und der Handhabung von Immunkomplexen beteiligt sind. In Analogie zu CR1 ist CR1L relevant für Prozesse, die mit der Kontrolle der Komplementkaskade, der angeborenen Immunüberwachung und dem Crosstalk zwischen Komplementsignalen und zellulären Antworten wie Phagozytose und Modulation von Entzündungsreaktionen verknüpft sind. Variationen in komplementregulatorischen Netzwerken werden allgemein mit Immundysregulation und entzündlicher Gewebeschädigung in Verbindung gebracht, was CR1L zu einem nützlichen Lokus für mechanistische Studien komplementassoziierter Phänotypen macht. Die experimentelle Untersuchung von CR1L unterstützt die Forschung zu komplementgetriebenen Signalwegen, zur Funktion rezeptorähnlicher Domänen und zu Genotyp-Phänotyp-Beziehungen in immunrelevanten Zellmodellen.
CR1L Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CR1L-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CR1L abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CR1L-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CR1L-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.