CPTI-M 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401456-NIC

CPT1B는 카르니틴 팔미토일전이효소 1B(CPTI-M)를 암호화하는 유전자로, 근육과 연관된 미토콘드리아 외막 효소이며 미토콘드리아로의 유입 및 이후 β-산화를 위해 필요한 장쇄 아실카르니틴 형성의 속도결정 단계를 촉매합니다. CPTI-M은 지방산의 미토콘드리아 기질 내 유입을 조절함으로써 지질 분해대사, 에너지 항상성, 그리고 지방산과 포도당 사이의 기질 전환을 조절하는 데 기여하며, AMPK 신호전달, PPAR에 의해 구동되는 대사 전사 프로그램, 그리고 말로닐-CoA 매개 지방산 플럭스 조절과 통합적으로 연계됩니다. CPT1B의 활성 또는 발현 변화는 지방산 산화의 이상 조절, 지질독성 스트레스, 그리고 심대사성 표현형 및 근육 에너지 대사와 관련된 대사 재형성과 연관되어 왔습니다. 연구 환경에서 CPT1B는 흔히 미토콘드리아 기능, 아실카르니틴 프로파일링, 산화 능력, 그리고 영양소 가용성에 대한 대사 적응의 맥락에서 조사됩니다.

CPTI-M 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 CPT1B 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 CPT1B 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 CPT1B의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, CPT1B 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.