Plasmide Double Nickase (h) CPEB2: sc-409367-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CPEB2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CPEB2 Double Nickase (h) et le plasmide CPEB2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CPEB2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CPEB2 | sc-409367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CPEB2 | sc-409367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CPEB2 (cytoplasmic polyadenylation element binding protein 2) est une protéine liant l’ARN qui reconnaît des éléments de polyadénylation cytoplasmique dans les ARNm cibles afin de réguler la longueur de la queue poly(A), la traduction et la stabilité des ARNm. Elle contribue à des programmes de contrôle post‑transcriptionnel de l’expression génique impliqués dans la différenciation cellulaire, les réponses au stress et la modulation contextuelle de la synthèse protéique. Grâce à une régulation translationnelle sélective, CPEB2 influence des voies liées à l’adaptation cellulaire, telles que la signalisation associée à l’hypoxie et la dynamique des granules d’ARN, avec des effets en aval sur la prolifération et la survie. Une activité dérégulée de CPEB2 et une altération du métabolisme de l’ARN ont été étudiées en lien avec la biologie tumorale et d’autres maladies où un contrôle translationnel aberrant constitue une caractéristique majeure.
CPEB2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CPEB2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CPEB2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CPEB2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CPEB2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.