Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) connexin 43: sc-400241-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) connexin 43 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide connexin 43 Double Nickase (h) et le plasmide connexin 43 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GJA1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: connexin 43 Antibody (F-7): sc-271837
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) connexin 43 | sc-400241-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) connexin 43 | sc-400241-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **GJA1** code la connexine 43 (Cx43), une protéine majeure des jonctions communicantes qui s'assemble en connexons hexamériques pour former des canaux intercellulaires permettant l'échange direct d'ions et de petits métabolites. Via la communication intercellulaire par jonctions communicantes, Cx43 régule le couplage électrique, la signalisation calcique, l'homéostasie tissulaire et les réponses coordonnées au stress, avec des rôles importants dans la conduction cardiaque, la réparation des plaies et l'établissement des patrons du développement. La connexine 43 est contrôlée de manière dynamique par un trafic et un renouvellement dépendants de la phosphorylation, ce qui la relie à des voies impliquant la PKC, MAPK/ERK et le remodelage du cytosquelette. Une expression altérée de **GJA1** ou une fonction canalaires perturbée ont été associées à des phénotypes arythmogènes, à une réparation tissulaire déficiente et à des modifications liées au cancer de la communication cellule–cellule et de l'invasion.
connexin 43 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GJA1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GJA1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GJA1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GJA1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.