COMMD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404544

概要

COMMD1（銅代謝MURR1ドメイン含有タンパク質1）は、ユビキチン依存性シグナル伝達と膜輸送を制御する多機能アダプタータンパク質であり、銅恒常性および細胞内タンパク質代謝回転において重要な役割を担います。主要な経路構成因子の安定性や核内動態に影響を与えることでNF-κBの転写活性を調節し、その結果、炎症反応やストレス応答プログラムに影響を及ぼします。さらにCOMMD1は、エンドソームソーティング機構やイオン輸送過程とも連携し、上皮および肝臓の生理機能に寄与します。COMMD1機能の変化は、金属取り扱いの異常、酸化ストレス感受性の亢進、ならびに炎症性シグナル伝達の破綻と関連づけられており、肝臓生物学、代謝ストレス、がん関連シグナル伝達ネットワークの研究において重要なテーマとなっています。

COMMD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCOMMD1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、COMMD1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、COMMD1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、COMMD1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、COMMD1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、COMMD1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• COMMD1の機能に不可欠なCOMMD1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、COMMD1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• COMMD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCOMMD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、COMMD1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  COMMD1 HDRプラスミド（h）および COMMD1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCOMMD1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCOMMD1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。