Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CNTFRα (h): sc-402322
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CNTFRα Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CNTFRα, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CNTFRα Antibody (AN-B2): sc-9993
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CNTFRα (h) | sc-402322 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CNTFR (récepteur alpha du facteur neurotrophique ciliaire ; CNTFRα) code une sous-unité de récepteur ancrée à la membrane par un glycosylphosphatidylinositol (GPI), qui se lie au facteur neurotrophique ciliaire et s’assemble avec LIFR et IL6ST/GP130 pour initier la signalisation. L’engagement du récepteur active les voies JAK/STAT, MAPK/ERK et PI3K/AKT, qui régulent la survie neuronale, la différenciation et les réponses gliales, et peuvent influencer plus largement les interactions (cross-talk) entre voies de signalisation des cytokines. CNTFRα contribue au neurodéveloppement et à la biologie neuromusculaire et est fréquemment étudié dans des contextes de maintien des motoneurones, de réponse aux lésions des nerfs périphériques et de signalisation neuro-inflammatoire. Une activité altérée de l’axe CNTF–CNTFR a été associée à des phénotypes neurologiques et à des processus liés aux maladies, tels que l’intégrité axonale, l’innervation musculaire et la régulation du destin cellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CNTFRα (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CNTFR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CNTFR, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CNTFR à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CNTFRα.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CNTFR pour l'étude de la signalisation de CNTFRα, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CNTFR essentiels à la fonction de CNTFRα
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CNTFR pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CNTFRα plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CNTFRα plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CNTFR. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CNTFRα plasmide HDR (h) et le CNTFRα (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CNTFR pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CNTFR définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.