Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CNTFRα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402322
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CNTFRα El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CNTFRα, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CNTFRα Anticuerpo (AN-B2): sc-9993
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CNTFRα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402322 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CNTFR (receptor alfa del factor neurotrófico ciliar; CNTFRα) codifica una subunidad receptora anclada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) que se une al factor neurotrófico ciliar y se ensambla con LIFR e IL6ST/GP130 para iniciar la señalización. La unión al receptor activa las vías JAK/STAT, MAPK/ERK y PI3K/AKT, que regulan la supervivencia y la diferenciación neuronal, así como las respuestas gliales, y pueden influir en una comunicación cruzada más amplia de la señalización de citocinas. CNTFRα contribuye a la biología del neurodesarrollo y neuromuscular, y se estudia con frecuencia en contextos de mantenimiento de motoneuronas, respuestas a lesiones de nervios periféricos y señalización neuroinflamatoria. La actividad alterada del eje CNTF–CNTFR se ha asociado con fenotipos neurológicos y procesos relevantes para la enfermedad, como la integridad axonal, la inervación muscular y la regulación del destino celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CNTFRα (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CNTFR en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CNTFR junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CNTFR tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CNTFRα.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CNTFR para la investigación de la señalización de CNTFRα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CNTFR críticos para la función de CNTFRα
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CNTFR para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CNTFRα CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CNTFRα CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CNTFR. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CNTFRα (h) y el plásmido HDR CNTFRα (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CNTFR para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CNTFR definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.