CNP-53 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403527
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CNP-53 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CNP-53, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CNP Anticorpo (C-9): sc-374043
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CNP-53 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403527 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NPPC codifica o peptídeo natriurético do tipo C, e a isoforma CNP-53 é um peptídeo secretado bioativo que sinaliza principalmente por meio do receptor de peptídeo natriurético 2 (NPR2/guanilil ciclase B), elevando os níveis intracelulares de cGMP. Essa via regula a ossificação endocondral e a homeostase da cartilagem, modula o tônus vascular e a função endotelial, e influencia a atividade de fibroblastos e a remodelação da matriz extracelular. A sinalização CNP/NPR2 interage com as redes de MAPK e de óxido nítrico–cGMP, moldando programas de proliferação e diferenciação em tipos celulares mesenquimais e vasculares. A atividade desregulada de NPPC tem sido associada a fenótipos da placa de crescimento e do desenvolvimento esquelético, bem como a processos cardiometabólicos e fibróticos relevantes para modelagem de doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CNP-53 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NPPC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NPPC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NPPC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CNP-53.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NPPC para a investigação da sinalização de CNP-53, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NPPC críticos para a função CNP-53
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NPPC para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CNP-53 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CNP-53 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NPPC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CNP-53 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CNP-53 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NPPC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NPPC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.