Plasmide CRISPR/Cas9 KO CNBP (m): sc-419712
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CNBP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CNBP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CNBP Antibody (H-7): sc-515387
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CNBP (m) | sc-419712 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cnbp code la protéine de liaison aux acides nucléiques cellulaire (CNBP), une protéine à doigt de zinc conservée qui se lie à l’ADN et à l’ARN simple brin pour réguler la transcription et la traduction. CNBP participe au métabolisme des acides nucléiques et au contrôle de programmes d’expression génique liés à la croissance cellulaire, aux réponses au stress et à la signalisation associée à l’immunité. Elle a été impliquée dans la régulation d’éléments riches en guanine (G) et dans la modulation de voies qui influencent l’expression des cytokines et la différenciation cellulaire. Une altération de la fonction de CNBP est associée à des états d’expression génique dérégulés pertinents pour des phénotypes neuromusculaires et inflammatoires, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques dans des modèles murins.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CNBP (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cnbp dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cnbp, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cnbp à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CNBP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cnbp pour l'étude de la signalisation de CNBP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cnbp essentiels à la fonction de CNBP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cnbp pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CNBP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CNBP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cnbp. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CNBP plasmide HDR (m) et le CNBP (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cnbp pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cnbp définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.