Plasmide Double Nickase (m) CMTM6: sc-426447-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) CMTM6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CMTM6 Double Nickase (m) et le plasmide CMTM6 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cmtm6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) CMTM6 | sc-426447-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) CMTM6 | sc-426447-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cmtm6 code pour CMTM6, une protéine tétra‑transmembranaire du domaine MARVEL qui régule la biologie des checkpoints immunitaires en stabilisant PD‑L1 à la surface cellulaire et en limitant sa dégradation lysosomale. En contrôlant le trafic de PD‑L1 et sa rétention membranaire, CMTM6 influence la signalisation cellule‑cellule, les réponses des lymphocytes T spécifiques d’un antigène et, plus largement, les voies inflammatoires dans le microenvironnement tumoral. Dans les systèmes murins, CMTM6 est largement étudiée pour son rôle dans les mécanismes d’échappement immunitaire et son impact sur les états de signalisation induits par l’interféron. Une activité dérégulée de l’axe CMTM6–PD‑L1 a été associée à une surveillance immunitaire altérée dans des modèles de cancer ainsi qu’à des processus de maladies à médiation immunitaire dépendant de la régulation des checkpoints.
CMTM6 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cmtm6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cmtm6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cmtm6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cmtm6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.