CMTM6 Plasmide Double Nickase (m): sc-426447-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CMTM6 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CMTM6 Double Nickase Plasmid (m) e il CMTM6 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cmtm6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CMTM6 Plasmide Double Nickase (m) | sc-426447-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CMTM6 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-426447-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cmtm6 codifica CMTM6, una proteina a quattro domini transmembrana con dominio MARVEL che regola la biologia dei checkpoint immunitari stabilizzando PD-L1 sulla superficie cellulare e limitandone la degradazione lisosomiale. Attraverso il controllo del traffico di PD-L1 e della sua ritenzione in membrana, CMTM6 influenza la segnalazione cellula-cellula, le risposte delle cellule T antigeno-specifiche e vie infiammatorie più ampie nel microambiente tumorale. Nei sistemi murini, CMTM6 è ampiamente studiata per il suo ruolo nei meccanismi di evasione immunitaria e per il suo impatto su stati di segnalazione guidati dall’interferone. Un’attività deregolata dell’asse CMTM6–PD-L1 è stata associata ad alterazioni della sorveglianza immunitaria in modelli di cancro e a processi patologici immunomediati che dipendono dalla regolazione dei checkpoint.
CMTM6 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cmtm6 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cmtm6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cmtm6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cmtm6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.