Plasmide Double Nickase (h) CMTM6: sc-412381-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CMTM6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CMTM6 Double Nickase (h) et le plasmide CMTM6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CMTM6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CMTM6 | sc-412381-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CMTM6 | sc-412381-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CMTM6 (protéine 6 contenant un domaine transmembranaire MARVEL de type CKLF) est une protéine membranaire multipasse qui régule la signalisation des checkpoints immunitaires en stabilisant PD-L1 à la surface cellulaire et en limitant sa dégradation lysosomale. Par ses interactions avec la machinerie de trafic endosomal, CMTM6 influence le recyclage des protéines membranaires et des processus liés à la présentation d’antigènes, modulant ainsi les voies sensibles aux interférons et les phénotypes d’échappement immunitaire en biologie tumorale. Une expression altérée de CMTM6 a été associée à la modulation de l’activité des lymphocytes T dans le microenvironnement tumoral ainsi qu’à des contextes oncogéniques où l’abondance de PD-L1 constitue un déterminant clé de la dynamique de signalisation immunitaire. À ce titre, CMTM6 est largement étudiée en immunologie des cancers, en protéostasie des protéines de surface et dans les mécanismes de transport vésiculaire des cellules humaines.
CMTM6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CMTM6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CMTM6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CMTM6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CMTM6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.