Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CMAS (h): sc-409575
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CMAS Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CMAS, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CMAS Antibody (E-8): sc-398296
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CMAS (h) | sc-409575 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CMAS code la cytidine monophosphate N‑acétylneuraminique acid synthétase, une enzyme nucléaire qui catalyse la conversion du Neu5Ac en CMP‑Neu5Ac, le substrat donneur activé requis pour les réactions de sialylation dans l’appareil de Golgi. En contrôlant la disponibilité du CMP‑acide sialique, CMAS influence la sialylation des glycoprotéines et des glycolipides, avec des effets sur les interactions cellule‑cellule, la signalisation des récepteurs, la reconnaissance immunitaire et la stabilité des protéines à la membrane plasmique. L’activité de CMAS relie le métabolisme central des glucides à la biosynthèse des glycoconjugués au sein de la voie de l’acide sialique et, plus largement, des réseaux de glycosylation. Les altérations des profils de sialylation associées à une dérégulation de la fonction de CMAS sont pertinentes pour l’étude des troubles congénitaux de la glycosylation, des phénotypes neurodéveloppementaux et du remodelage de la surface cellulaire dans le cancer.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CMAS (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CMAS dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CMAS, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CMAS à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CMAS.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CMAS pour l'étude de la signalisation de CMAS, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CMAS essentiels à la fonction de CMAS
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CMAS pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CMAS plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CMAS plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CMAS. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CMAS plasmide HDR (h) et le CMAS (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CMAS pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CMAS définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.