Plasmide Double Nickase (m) CLEC-9A: sc-433169-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) CLEC-9A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CLEC-9A Double Nickase (m) et le plasmide CLEC-9A Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Clec9a. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) CLEC-9A | sc-433169-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Clec9a** code **CLEC-9A (DNGR-1)**, un récepteur lectine de type C exprimé de façon sélective par des sous-populations de cellules dendritiques conventionnelles spécialisées dans la détection des dommages cellulaires. **CLEC-9A** se lie aux structures d’actine exposées par les cellules nécrotiques et favorise la capture ainsi que la présentation croisée d’antigènes associés aux cellules mortes, contribuant ainsi à l’amorçage des lymphocytes T CD8+. La signalisation est couplée à un motif **hemITAM** et à des voies dépendantes de **Syk** qui influencent le traitement antigénique, la maturation phagosomale et la programmation inflammatoire des cellules dendritiques. Une fonction altérée de **CLEC-9A** est pertinente pour l’étude de l’inflammation stérile, de la cross-amorçage des antigènes tumoraux, de l’immunité antivirale et de la pathogenèse auto-immune, où la manière dont les cellules dendritiques gèrent les cellules mourantes peut moduler l’activation immunitaire.
CLEC-9A Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Clec9a dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Clec9a. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Clec9a. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Clec9a.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.