Plasmide CRISPR/Cas9 KO CKR-9 (m): sc-419702
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CKR-9 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CKR-9, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CKR-9 Antibody (CW-2.2.1): sc-47722
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CKR-9 (m) | sc-419702 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Ccr9 code pour CKR-9 (CCR9), un récepteur de chimiokines couplé aux protéines G surtout connu pour sa liaison à CCL25 et pour son rôle dans l’orientation du trafic chimiotactique des lymphocytes. Chez la souris, CCR9 contribue au développement des thymocytes et aux programmes d’homing intestinal en modulant les signaux migratoires, l’adhésion dépendante des intégrines et le positionnement au sein des microenvironnements tissulaires. La signalisation de CKR-9 s’interface avec les voies canoniques des GPCR, notamment les flux calciques et les cascades MAPK/PI3K, qui influencent l’état d’activation, la survie et la motilité des cellules immunitaires. Une dérégulation de l’axe CCR9–CCL25 a été impliquée dans des processus inflammatoires au niveau des sites muqueux ainsi que dans des mécanismes favorisant une localisation aberrante des leucocytes, pertinente pour des pathologies à médiation immunitaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CKR-9 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ccr9 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ccr9, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ccr9 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CKR-9.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ccr9 pour l'étude de la signalisation de CKR-9, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ccr9 essentiels à la fonction de CKR-9
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ccr9 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CKR-9 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CKR-9 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ccr9. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CKR-9 plasmide HDR (m) et le CKR-9 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ccr9 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ccr9 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.