Plasmide Double Nickase (h) CKR-1: sc-402247-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CKR-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CKR-1 Double Nickase (h) et le plasmide CKR-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CKR-1 | sc-402247-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CKR-1 | sc-402247-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCR1 code pour le récepteur de chimiokines CKR-1 (également appelé CD191), un RCPG à sept domaines transmembranaires qui se lie à des chimiokines CC telles que CCL3, CCL5, CCL7 et CCL23 afin de réguler la chimiotaxie, l’adhésion et l’infiltration tissulaire des leucocytes. La liaison du ligand active une signalisation dépendante de Gαi, avec en aval un flux de calcium, ainsi que les voies PI3K/AKT, MAPK et des petites GTPases, qui coordonnent l’activation des intégrines et la migration cellulaire dirigée. L’activité de CCR1 contribue à l’amplification des circuits inflammatoires dans les cellules myéloïdes et est fréquemment étudiée dans le contexte du trafic des cellules immunitaires à travers les barrières vasculaires et tissulaires. Une dérégulation de la signalisation de CCR1 a été associée à des affections inflammatoires chroniques et a été explorée dans le recrutement myéloïde associé aux tumeurs et le remodelage du microenvironnement dans plusieurs modèles de maladie.
CKR-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.