Plasmide Double Nickase (h) CGRP2: sc-401165-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CGRP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CGRP2 Double Nickase (h) et le plasmide CGRP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CALCB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CGRP2 | sc-401165-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CGRP2 | sc-401165-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CALCB code le peptide 2 apparenté au gène de la calcitonine (CGRP2), un neuropeptide produit par maturation protéolytique et qui signale principalement via le récepteur de type calcitonine (CALCRL) en complexe avec des protéines modulatrices de l’activité du récepteur (RAMP). CGRP2 active une signalisation couplée à Gs, augmentant l’AMPc et engageant des programmes transcriptionnels en aval dépendants de PKA/CREB, ce qui influence le tonus vasomoteur, l’inflammation neurogène, la transmission nociceptive et la communication neuro-immune. Dans les voies sensorielles périphériques et centrales, les peptides de la famille CGRP coordonnent les réponses vasculaires et immunitaires à l’activité neuronale et modulent l’excitabilité synaptique. Une signalisation CGRP dérégulée a été impliquée dans la biologie de la migraine, les états de douleur inflammatoire et l’homéostasie vasculaire, faisant de CALCB une cible pertinente pour des études mécanistiques dans des modèles neurovasculaires et neuroinflammatoires.
CGRP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CALCB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CALCB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CALCB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CALCB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.