Plasmide Double Nickase (h) CES1: sc-405773-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CES1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CES1 Double Nickase (h) et le plasmide CES1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CES1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CES1 Antibody (A-11): sc-365249
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CES1 | sc-405773-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CES1 | sc-405773-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La carboxylestérase 1 (CES1) est une hydrolase à sérine fortement exprimée dans le foie humain, qui catalyse l’hydrolyse d’un large éventail de lipides endogènes ainsi que d’esters, d’amides et de thioesters xénobiotiques. En régulant le renouvellement des lipides neutres et des métabolites estérifiés, CES1 contribue à l’homéostasie lipidique et s’inscrit au carrefour de processus métaboliques et de détoxification qui façonnent l’équilibre rédox cellulaire et la signalisation inflammatoire. Une activité ou une expression altérée de CES1 a été associée à une variabilité interindividuelle du métabolisme des médicaments et à des phénotypes métaboliques liés à la dyslipidémie et à des pathologies associées à la stéatose hépatique. En conséquence, CES1 est largement utilisée comme outil moléculaire pour étudier le métabolisme hépatique, la biotransformation chimique et les mécanismes à l’origine des réponses variables aux composés dans des systèmes humains.
CES1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CES1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CES1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CES1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CES1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.