Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ceruloplasmin Double Nickase Plasmid (h): sc-401798-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ceruloplasmin Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ceruloplasmin Double-Nickase-Plasmid (h) und ceruloplasmin Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CP abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: ceruloplasmin: sc-365205
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ceruloplasmin Double Nickase Plasmid (h) | sc-401798-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ceruloplasmin Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401798-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen **CP** kodiert **Ceruloplasmin**, eine Multikupfer-Ferroxidase, die **Fe2+ zu Fe3+** oxidiert, um die Beladung von Transferrin zu erleichtern und die systemische sowie zelluläre Eisenhomöostase aufrechtzuerhalten. Als wichtiges kupferbindendes Plasmaprotein verknüpft Ceruloplasmin den Kupfertransport mit der Redoxkontrolle und begrenzt prooxidative Eisenchemie, die die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies verstärken kann. Die CP-Aktivität beeinflusst die extrazelluläre antioxidative Kapazität und steht in Wechselwirkung mit Eisen-Transportwegen in Hepatozyten, Makrophagen und Zellen des zentralen Nervensystems. Eine veränderte Ceruloplasmin-Expression oder -Funktion ist mit Fehlverteilung von Eisen und oxidativem Stress assoziiert, was für Phänotypen relevant ist, die mit Neurodegeneration, metabolischer Dysregulation und entzündlichen Zuständen zusammenhängen.
ceruloplasmin Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CP-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CP abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CP-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CP-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.