Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ceruloplasmin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401798
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ceruloplasmin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ceruloplasmin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ceruloplasmin Anticuerpo (H-3): sc-365205
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ceruloplasmin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401798 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CP codifica la ceruloplasmina, una oxidasa multicobre que se une al cobre y cataliza la oxidación de Fe²⁺ a Fe³⁺ para favorecer la carga de transferrina y la distribución sistémica del hierro. Es un componente clave de la homeostasis del cobre y de la actividad ferroxidasa, y conecta la secreción hepática y el control redox extracelular con el tráfico de hierro y las respuestas al estrés oxidativo. La función de la ceruloplasmina se cruza con vías que regulan la exportación de hierro, el equilibrio de especies reactivas de oxígeno y la señalización inflamatoria en tejidos con alta demanda metabólica. La actividad desregulada de CP se asocia con alteraciones en el manejo del hierro y fenotipos de daño oxidativo, lo que la convierte en una diana útil para estudiar mecanismos relevantes para la neurodegeneración, la fisiología hepática y modelos de estrés celular relacionados con la anemia.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ceruloplasmin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ceruloplasmin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CP para la investigación de la señalización de ceruloplasmin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CP críticos para la función de ceruloplasmin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CP para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ceruloplasmin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ceruloplasmin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ceruloplasmin (h) y el plásmido HDR ceruloplasmin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.