Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CEP55 (h): sc-417522
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CEP55 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CEP55, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CEP55 Antibody (B-8): sc-374051
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CEP55 (h) | sc-417522 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CEP55 (protéine centrosomale 55) est un régulateur de la cytocinèse qui se localise aux centrosomes et au midbody (corps intermédiaire), où il favorise l’abscission en coordonnant le recrutement de la machinerie ESCRT lors de la mitose tardive. Par ses interactions avec des protéines d’échafaudage du midbody et des facteurs de remodelage membranaire, CEP55 contribue à assurer une division cellulaire fidèle, la stabilité du génome et l’achèvement correct du cycle cellulaire. Une expression dérégulée de CEP55 a été associée à des phénotypes prolifératifs et à une instabilité chromosomique observés dans plusieurs contextes cancéreux, ce qui en fait une cible utile pour étudier le contrôle mitotique. CEP55 est également impliquée dans des voies régissant la dynamique des centrosomes, l’organisation du fuseau mitotique et les réponses des points de contrôle (checkpoints) en cas d’échec de la cytocinèse.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CEP55 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CEP55 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CEP55, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CEP55 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CEP55.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CEP55 pour l'étude de la signalisation de CEP55, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CEP55 essentiels à la fonction de CEP55
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CEP55 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CEP55 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CEP55 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CEP55. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CEP55 plasmide HDR (h) et le CEP55 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CEP55 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CEP55 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.