Plasmide Double Nickase (h) CDK5RAP3: sc-408965-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CDK5RAP3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CDK5RAP3 Double Nickase (h) et le plasmide CDK5RAP3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDK5RAP3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CDK5RAP3 Antibody (E-7): sc-271776
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CDK5RAP3 | sc-408965-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CDK5RAP3 | sc-408965-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK5RAP3 (également connu sous le nom de C53/LZAP) est une protéine adaptatrice multifonctionnelle impliquée dans la régulation de la progression du cycle cellulaire, des réponses au stress et de la signalisation intracellulaire. Elle a été associée à la modulation de la signalisation NF-κB et à des interactions avec des voies de contrôle qualité des protéines dépendantes de l’ubiquitine, influençant les sorties transcriptionnelles et la protéostasie. CDK5RAP3 participe également à l’homéostasie du réticulum endoplasmique et à des processus liés à l’autophagie, reliant la détection du stress cellulaire au contrôle de la croissance. Une expression ou une fonction dérégulée de CDK5RAP3 a été associée à des phénotypes modifiés de prolifération et de survie rapportés en biologie du cancer et dans des contextes de recherche liés à l’inflammation.
CDK5RAP3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDK5RAP3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDK5RAP3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDK5RAP3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDK5RAP3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.