Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) Cdk5: sc-419602-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Cdk5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Cdk5 Double Nickase (m) et le plasmide Cdk5 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cdk5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cdk5 Antibody (J-3): sc-6247
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Cdk5 | sc-419602-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Cdk5 | sc-419602-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La kinase 5 dépendante des cyclines (Cdk5) chez la souris est une sérine/thréonine kinase dirigée vers la proline, qui devient catalytiquement active par association avec des cofacteurs non cyclines tels que p35 (Cdk5r1) et p39 (Cdk5r2). Cdk5 régule la migration neuronale, la croissance des neurites, la dynamique des vésicules synaptiques et le remodelage du cytosquelette via la phosphorylation de substrats des réseaux de microtubules et d’actine, en interagissant avec la signalisation MAPK et des voies de kinases indépendantes du cycle cellulaire. Une activité de Cdk5 dérégulée a été associée à des phénotypes neurodégénératifs et neurodéveloppementaux, via une phosphorylation altérée de la protéine tau et d’autres substrats neuronaux, ainsi qu’une homéostasie synaptique perturbée. Au-delà de la biologie du système nerveux, la signalisation Cdk5 contribue aux réponses au stress et à une régulation dépendante du contexte de l’adhésion et de la motilité, soutenant des études mécanistiques dans plusieurs types cellulaires.
Cdk5 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cdk5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cdk5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cdk5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cdk5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.