Plásmido Doble Nickase (h) CDK11: sc-405330-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CDK11 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CDK11 (h) y el plásmido de doble nickasa CDK11 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CDK19. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdk11 Anticuerpo (8B6): sc-517026
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CDK11 | sc-405330-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CDK11 | sc-405330-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El CDK19 humano codifica una cinasa dependiente de ciclina que actúa dentro del módulo cinasa del complejo Mediator para integrar señales con la transcripción dependiente de la ARN polimerasa II. Al fosforilar reguladores transcripcionales e influir en la liberación de la pausa proximal al promotor, CDK19 contribuye al control de programas de expresión génica vinculados a la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés y la diferenciación. La actividad o expresión alterada de las CDK asociadas a Mediator se ha relacionado con una reprogramación transcripcional en el cáncer y otros trastornos proliferativos, lo que convierte a CDK19 en una diana relevante para desentrañar redes de señalización oncogénica e inflamatoria. De forma similar, los miembros de la familia de proteínas CDK11 también están implicados en procesos relacionados con la transcripción y el ciclo celular, lo que subraya la importancia más amplia del control transcripcional regulado por CDK en la biología humana.
CDK11 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDK19 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDK19. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDK19. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDK19 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.