CDK11 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405330

Übersicht

CDK19 kodiert eine cyclinabhängige Kinase, die innerhalb des Mediator-Kinase-Moduls wirkt und die von RNA-Polymerase II abhängige Transkription sowie die Phosphorylierung transkriptionsassoziierter Substrate moduliert. Durch die Regulation von Programmen der Transkriptionsinitiation und -elongation beeinflusst CDK19 die Zellzyklusprogression, die stressresponsive Genexpression und signalabhängige Transkriptionsnetzwerke, die mit MAPK- und anderen Signalwegen verknüpft sind. Eine dysregulierte CDK19-Aktivität oder -Expression wurde mit einer veränderten Kontrolle der Proliferation und einer Transkriptions-Neuverdrahtung in verschiedenen Krebsarten sowie anderen proliferativen Erkrankungen in Verbindung gebracht. CDK11 ist eine multifunktionale Serin/Threonin-Kinase, die an der Zellzyklusregulation, dem prä-mRNA-Spleißen und der Transkriptionskontrolle beteiligt ist und Studien zur Wechselwirkung von Kinasenetzwerken sowie zu kompensatorischer Signalgebung in humanen Zellen unterstützt.

Das CDK11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CDK19-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CDK19-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CDK19 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CDK11-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CDK19-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CDK11-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CDK19-Exone abzielen, die für die CDK11-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CDK19-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CDK11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CDK11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CDK19-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CDK11 HDR-Plasmid (h) und CDK11 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CDK19-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CDK19-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.