Plasmide Double Nickase (h) CD79B: sc-401760-NIC

CD79B code pour la sous-unité de signalisation Ig-β (CD79B) du complexe du récepteur de l’antigène des lymphocytes B (BCR), en formant un hétérodimère avec CD79A afin de coupler la reconnaissance de l’antigène à la signalisation intracellulaire. Ses motifs ITAM cytoplasmiques sont phosphorylés lors de l’engagement du BCR, recrutant SYK et propageant le signal via les voies BTK, PI3K–AKT et NF-κB, qui régulent l’activation, la survie et la différenciation des lymphocytes B. La fonction de CD79B influence le trafic du récepteur et l’amplitude du signal, en s’intégrant à des processus tels que la sélection dépendante de l’antigène et la tolérance immunitaire. Les altérations des composants de la voie du BCR, dont CD79B, sont largement étudiées dans le contexte de la dérégulation des lymphocytes B et de la biologie des hémopathies malignes, ce qui confirme sa pertinence en tant que nœud mécanistique en immunologie et en recherche sur les maladies hématologiques.

CD79B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD79B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD79B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD79B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD79B.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.