Plasmide Double Nickase (h) CD67: sc-405743-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD67 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD67 Double Nickase (h) et le plasmide CD67 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CEACAM8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD67 Antibody (GM2H6): sc-101383
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD67 | sc-405743-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD67 | sc-405743-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEACAM8 code pour CD67, un membre associé aux granulocytes de la famille des molécules d’adhérence cellulaire apparentées à l’antigène carcinoembryonnaire, fortement exprimé à la surface des neutrophiles humains et dont l’expression est augmentée lors de l’activation. CD67 participe aux interactions cellule–cellule et contribue à l’adhérence des neutrophiles, aux réponses associées à la dégranulation et à la modulation des signaux inflammatoires dans le système immunitaire inné. En raison de son rôle dans le trafic leucocytaire et les fonctions effectrices, CEACAM8 est fréquemment étudié dans des voies liées à l’immunité des muqueuses, à la défense antimicrobienne et à l’inflammation induite par les cytokines. Des profils d’expression altérés dans les cellules myéloïdes et les tissus inflammatoires ont fait de CEACAM8 un marqueur de recherche utile dans les études des troubles inflammatoires et de l’infiltration immunitaire associée aux tumeurs.
CD67 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CEACAM8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CEACAM8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CEACAM8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CEACAM8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.