Particules Lentivirales d'Activation (m) CD64: sc-420305-LAC

Le gène murin **Fcgr1** code **CD64 (FcγRI)**, un récepteur du fragment Fc des IgG à haute affinité, exprimé principalement par les monocytes, les macrophages, les cellules dendritiques et les neutrophiles activés. CD64 couple la reconnaissance des complexes immuns à la signalisation via la chaîne γ des FcR, favorisant l’activation de **Syk** dépendante des **ITAM** et de voies en aval telles que **PI3K–AKT**, **MAPK** et **NF-κB**, qui régulent la phagocytose, l’explosion oxydative, la production de cytokines et la présentation d’antigènes. Par ces mécanismes, Fcgr1 influence la détection immunitaire innée, la polarisation des cellules myéloïdes et les interactions avec l’immunité adaptative. Une activité ou une expression dérégulée de CD64 est fréquemment utilisée comme marqueur et point mécanistique central dans des études portant sur l’inflammation, l’infection et les pathologies de type auto-immun liées aux complexes immuns, dans des modèles murins.

Les particules d'activation lentivirales CD64 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Fcgr1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD64 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Fcgr1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD64. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Fcgr1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.