Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD63 (m): sc-419564
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD63 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD63, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD63 Antibody (MX-49.129.5): sc-5275
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD63 (m) | sc-419564 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cd63 code pour CD63, une tétraspanine enrichie dans les endosomes tardifs, les lysosomes et les vésicules extracellulaires, où elle organise des microdomaines enrichis en tétraspanines et coordonne le trafic des protéines membranaires. CD63 participe à la maturation endosomale, à la biogenèse des corps multivésiculaires, au tri du contenu des exosomes et à la régulation du renouvellement des récepteurs, influençant ainsi des processus tels que l’adhésion cellulaire, la migration et la signalisation des cellules immunitaires. Grâce à ses interactions avec les intégrines et d’autres tétraspanines, CD63 affecte des voies de transport vésiculaire qui façonnent la présentation de l’antigène et la communication intercellulaire. Une expression ou une localisation altérée de CD63 est fréquemment utilisée comme indicateur en biologie du cancer, en inflammation et dans des modèles de maladies infectieuses, en raison de son association étroite avec la dynamique des vésicules et la signalisation du microenvironnement tumoral.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD63 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cd63 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cd63, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cd63 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD63.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cd63 pour l'étude de la signalisation de CD63, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cd63 essentiels à la fonction de CD63
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cd63 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD63 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD63 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cd63. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD63 plasmide HDR (m) et le CD63 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cd63 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cd63 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.