CD63 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419564

개요

Cd63는 후기 엔도좀, 리소좀 및 세포외 소포(extracellular vesicle)에 풍부한 테트라스패닌인 CD63을 암호화하며, 이들 막 구획에서 테트라스패닌-풍부 미세영역을 조직하고 막단백질 수송을 조율합니다. CD63은 엔도좀 성숙, 다중소포체(MVB) 형성, 엑소좀 화물(cargo) 분류, 수용체 턴오버 조절에 관여하여 세포 접착, 이동, 면역세포 신호전달 같은 과정에 영향을 줍니다. 인테그린 및 다른 테트라스패닌과의 상호작용을 통해 CD63은 항원 제시와 세포 간 소통을 형성하는 소포성 수송 경로에 영향을 미칩니다. CD63의 발현이나 세포 내 위치 변화는 소포 역학 및 종양 미세환경 신호와 밀접하게 연관되어 있어, 암 생물학, 염증, 감염성 질환 모델에서 흔히 지표(readout)로 활용됩니다.

CD63 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cd63 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cd63 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cd63의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CD63 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CD63 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cd63 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CD63 기능에 중요한 Cd63 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cd63 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CD63 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CD63 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cd63 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CD63 HDR 플라스미드 (m) 및 CD63 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cd63 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cd63 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.