Plasmide Double Nickase (h) CD6: sc-403748-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD6 Double Nickase (h) et le plasmide CD6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD6 Antibody (SPV-L14): sc-7320
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD6 | sc-403748-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD6 | sc-403748-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD6 est une glycoprotéine de surface exprimée principalement par les lymphocytes T, qui agit comme co‑récepteur lors de l’activation antigène‑dépendante en médiant des interactions d’adhérence et de signalisation au niveau de la synapse immunologique, notamment via la liaison à ALCAM/CD166. Grâce à ses motifs de signalisation cytoplasmiques et à son couplage à des kinases et à des protéines adaptatrices, CD6 module la signalisation proximale du TCR, le remodelage du cytosquelette et des voies en aval telles que MAPK et NF‑κB, qui influencent la prolifération, la différenciation et la production de cytokines des lymphocytes T. Une activité altérée de CD6 a été associée à une dérégulation de la tolérance immunitaire et des réponses inflammatoires, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de l’auto-immunité et de l’inflammation chronique. CD6 est également utilisé comme marqueur et nœud fonctionnel en biologie des lymphocytes, avec des implications pour les interactions tumeur‑système immunitaire et les mécanismes d’échappement immunitaire.
CD6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.