Particules Lentivirales d'Activation (h) CD55: sc-400738-LAC

CD55 (facteur accélérateur de la décroissance, DAF) est un régulateur du complément à la surface cellulaire, ancré par un glycosylphosphatidylinositol (GPI), qui perturbe les convertases C3/C5 afin de limiter l’amplification du complément sur les membranes de l’hôte. En contrôlant l’activation du complément, CD55 influence la surveillance immunitaire innée, la signalisation inflammatoire et les interactions cellule–cellule au niveau de la synapse immunologique, et peut moduler la sensibilité au stress dépendant du complément. Une expression altérée de CD55 a été associée à une dérégulation immunitaire et à une physiopathologie inflammatoire, et elle est fréquemment étudiée dans le contexte des lésions tissulaires médiées par le complément et des mécanismes d’échappement tumoral au système immunitaire. En tant que protéine membranaire largement exprimée, CD55 est également utilisée comme marqueur dans des études sur le trafic des glycoprotéines de surface et l’organisation des microdomaines.

Les particules d'activation lentivirales CD55 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de CD55 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD55 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription CD55, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD55. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif CD55 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.