Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) CD3-δ: sc-401519-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD3-δ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD3-δ Double Nickase (h) et le plasmide CD3-δ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD3D. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD3-δ Antibody (F-1): sc-137137
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD3-δ | sc-401519-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD3-δ | sc-401519-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD3D code pour CD3-δ, un composant essentiel du complexe récepteur des cellules T (TCR)–CD3, qui couple la reconnaissance de l’antigène à la signalisation intracellulaire. CD3-δ participe à l’assemblage et à l’expression à la surface cellulaire du complexe TCR et transmet les signaux d’activation via des motifs d’activation à base de tyrosine des immunorécepteurs (ITAM) présents dans les chaînes CD3 associées, en recrutant la signalisation LCK/ZAP70 ainsi que les voies MAPK, NF-κB et NFAT en aval. Par ces mécanismes, CD3-δ contribue au développement des thymocytes, à l’activation des cellules T et à l’homéostasie de l’immunité adaptative. Une fonction altérée de CD3D est pertinente pour les études sur l’immunodéficience des cellules T, la signalisation immunitaire aberrante et les mécanismes d’immuno-oncologie, où l’intensité et la composition de la signalisation du TCR façonnent les phénotypes cellulaires.
CD3-δ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD3D dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD3D. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD3D. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD3D.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.