Plasmide Double Nickase (h) CD27L: sc-402625-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD27L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD27L Double Nickase (h) et le plasmide CD27L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD70. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD27L Antibody (G-7): sc-365539
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD27L | sc-402625-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD27L | sc-402625-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD70, également connu sous le nom de ligand de CD27 (CD27L), est un membre de la superfamille du TNF de type II, transmembranaire, exprimé principalement par les cellules présentatrices d’antigène activées et par certains sous-ensembles de lymphocytes. En se liant à CD27 sur les cellules T et B, CD70 fournit des signaux co-stimulateurs qui modulent l’activation, la prolifération, la survie et la différenciation des lymphocytes, en soutenant les réponses des centres germinatifs et le développement des effecteurs cytotoxiques. La signalisation CD70–CD27 s’articule avec des programmes transcriptionnels dépendants de NF-κB et des MAPK et contribue à réguler l’homéostasie immunitaire lors de l’inflammation. Une expression dérégulée de CD70 a été associée à des états d’activation immunitaire altérés et fait fréquemment l’objet d’études dans le contexte des microenvironnements immunitaires tumoraux et de la biologie des maladies inflammatoires chroniques.
CD27L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD70 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD70. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD70. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD70.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.