Particules Lentivirales d'Activation (m) CD22: sc-419539-LAC

Le gène murin Cd22 code CD22, une lectine de type immunoglobuline se liant à l’acide sialique, restreinte aux lymphocytes B, qui fonctionne comme co‑récepteur inhibiteur du récepteur des lymphocytes B (BCR). En recrutant des phosphatases telles que SHP‑1 sur des motifs ITIM, CD22 atténue la signalisation proximale du BCR et module des voies en aval, notamment PI3K/AKT, MAPK et les flux calciques, façonnant ainsi les seuils d’activation, la survie et la sélection dépendante de l’antigène. CD22 contribue également à l’adhésion et au trafic des lymphocytes B via des interactions avec des glycanes α2,6‑sialylés et influence la dynamique des centres germinatifs ainsi que les points de contrôle de la tolérance. Une expression ou une signalisation dérégulée de CD22 est largement pertinente pour l’étude de l’hyperréactivité des lymphocytes B, de la régulation immunitaire associée à l’auto-immunité et des mécanismes de malignité de la lignée B dans des modèles murins expérimentaux.

Les particules d'activation lentivirales CD22 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Cd22 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD22 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Cd22, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD22. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Cd22 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.