Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD21 (m): sc-419789
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD21 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD21, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD21 Antibody (A-3): sc-13135
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD21 (m) | sc-419789 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cr2 code pour CD21 (récepteur du complément 2), un récepteur de surface fortement exprimé sur les lymphocytes B et les cellules dendritiques folliculaires, qui se lie à des fragments du complément tels que C3d afin d’abaisser le seuil d’activation du récepteur des cellules B et de favoriser la rétention de l’antigène. CD21 agit au sein du complexe co‑récepteur CD19–CD81 pour amplifier la signalisation via des voies telles que PI3K–AKT et MAPK, soutenant les réponses des centres germinatifs, la recombinaison de commutation de classe et la formation de cellules B mémoire. En immunologie murine, Cr2/CD21 est un élément central de l’immunité humorale dépendante du complément et de la gestion des complexes immuns, ce qui le rend pertinent pour l’étude d’une activation dérégulée des lymphocytes B, de la génération d’auto‑anticorps et de réponses de l’hôte altérées face aux agents pathogènes.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD21 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cr2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cr2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cr2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD21.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cr2 pour l'étude de la signalisation de CD21, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cr2 essentiels à la fonction de CD21
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cr2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD21 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD21 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cr2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD21 plasmide HDR (m) et le CD21 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cr2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cr2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.