Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD209f (m): sc-427311

Présentation

Cd209f code la protéine CD209f, un récepteur lectinique de type C exprimé principalement par les cellules myéloïdes présentatrices d’antigènes, où il participe à la reconnaissance de ligands glycosylés et favorise l’endocytose dépendante du récepteur. En coordonnant la détection des agents pathogènes, leur capture et le trafic intracellulaire, CD209f contribue au traitement des antigènes et à la régulation en aval des réponses immunitaires innées et adaptatives, y compris les programmes de cytokines inflammatoires. Ses liens fonctionnels avec l’activation des cellules dendritiques et des macrophages font de Cd209f une cible pertinente pour l’étude des interactions hôte–pathogène, de l’immunité des barrières et des mécanismes de tolérance immunitaire.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD209f (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cd209f dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cd209f, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cd209f à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD209f.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cd209f pour l'étude de la signalisation de CD209f, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Cd209f essentiels à la fonction de CD209f
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cd209f pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le CD209f plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD209f plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cd209f. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le CD209f plasmide HDR (m) et le CD209f (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cd209f pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cd209f définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.