Particules Lentivirales d'Activation (m) CD206/Mannose Receptor/MMR: sc-421707-LAC

Mrc1 code pour CD206/récepteur du mannose (MMR), un récepteur scavenger de type lectine C, enrichi dans les macrophages et les cellules dendritiques, qui se lie aux glycannes contenant du mannose, du fucose et de la N‑acétylglucosamine présents sur les agents pathogènes et sur des glycoprotéines endogènes. CD206 médie l’endocytose et la phagocytose dépendantes de la clathrine, favorisant la capture et le traitement des antigènes, le trafic lysosomal et la reconnaissance des glycannes dans l’immunité innée. Il est largement utilisé comme marqueur de la polarisation des macrophages activés de façon alternative (de type M2) et participe à des voies qui façonnent le remodelage tissulaire, la réparation des plaies et des programmes de cytokines immunorégulatrices. Une expression altérée de CD206 est impliquée dans l’inflammation chronique, la fibrose, les dysfonctionnements métaboliques et la biologie des macrophages associés aux tumeurs, ce qui rend Mrc1 pertinent pour l’étude de la régulation du microenvironnement et des interactions hôte–pathogène dans des modèles murins.

Les particules d'activation lentivirales CD206/Mannose Receptor/MMR (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Mrc1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales CD206/Mannose Receptor/MMR (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Mrc1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de CD206/Mannose Receptor/MMR. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Mrc1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.