CD163 Lentiviral Activation Particles (m): sc-429989-LAC

Das Mausgen *Cd163* kodiert CD163, einen Scavenger-Rezeptor, der überwiegend auf Monozyten und Gewebemakrophagen exprimiert wird, Hämoglobin–Haptoglobin-Komplexe bindet und deren endozytotische Clearance unterstützt. Die CD163-Aktivität steht in Wechselwirkung mit Programmen der Makrophagenpolarisation und mit Netzwerken der Entzündungssignalgebung, einschließlich zytokingetriebener Signalwege, die Antigenverarbeitung, Reaktionen auf oxidativen Stress und die Auflösung von Entzündungen beeinflussen. Über die Regulation des Häm-/Eisenstoffwechsels und die Aufnahme immunmodulatorischer Liganden trägt CD163 zur Gewebehomöostase bei Hämolyse, steriler Verletzung und Pathogenexposition bei. Eine veränderte CD163-Expression und eine veränderte Verteilung von Makrophagen werden häufig als Indikatoren für myeloide Umstrukturierungen in Modellen chronischer Entzündung, metabolischer Dysregulation, Fibrose und der Biologie tumorassoziierter Makrophagen herangezogen.

CD163 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cd163-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD163 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cd163-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD163-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cd163-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.